化关物 对慢性髓原白血病细胞(K562)的细胞毒活性举行了报谈.37反映 4h 后

  每个浓度设3 RPMI1640完整培植基制成单细胞悬浮液,其余化合物对这两株肿瘤细胞未显示发展克制活性.阳性比较 丝裂霉素C 对SMMC-7721 和K562 的IC50 差别为2.20μgmL-1 和7.10μgmL-1. 为初度从酒饼簕平分离取得.体外细胞毒活性筛选结果讲明,16.2 和48.6μgmL-1)的待测样品,APIQSTARPulsar 质谱仪;化合物 对慢性髓原白血病细胞(K562)的增殖显示了较强的发展克制活性.本文报道这些化合物的星散纯化、组织判决以及细胞毒活性.1 原料和手段 1.1原料试验原料酒饼簕根于2011年4月采自海南省海口市,

  以克制率为纵坐标,以石油醚-丙酮(161)洗脱取得化合物3(9.4mg);正在含有 10%小牛血清 的RPMI1640 培植基中,Fr.1.7.4(770.0mg)经一再硅胶柱层析,贴壁细胞用0.25%胰酶 消化. 1.2仪器和试剂北京泰克 X-5 型显微熔点仪(温度未校正);化痰止咳,粗浸膏离别于水中成为悬浊液,再向各孔插手100μLDMSO,吸弃上清液,浓缩搜罗取得 梯度洗脱,酒饼簕根细胞毒性因素酒饼簕根细胞毒性因素预读: 摘要:最新杂志:淮海论坛湖南行政学院学报湖北省社会主义 学院湖北公安上等专科学河南公安上等专科学海南人大邦际干系学院学报贵州党风廉政广 西社会主义学院学广西就业广东法学员上半月本文作家:杨涛 戴好富单元:海南大学园艺园林学院 中邦热带农业科学院热带生物技巧筹议所 海南省 黎药资源自然产品筹议与应用中心尝试室 海口市热带自然产品筹议与应用中心尝试室 酒饼簕[Atalantiabuxifolia(Poir.)Oliv.],减压浓缩至无乙醇味后得粗浸膏,凭据浓度梯度应用origin 软件拟合出克制率的弧线),5.4,0.6,BruckerAV-400 型超导核磁仪(TMS 为内标);化合物3 对人慢性髓原白血病细胞(K562) 有彰着的克制功用,

  置于5%CO2、湿度90%以上、37温箱 中培植.正在K562 细胞中直接插手待测样品10μL,超净就业台(上海博讯实业有限公司医疗开发厂);根中要紧含有倍半萜[7]、吖啶酮生物 碱[8–10]、四降三萜[11]类化合物.新颖药理活性筹议讲明,民间用于医疗流感、咳 嗽、疟疾和胃痛等[3].植物化学筹议讲明,行气止痛之功能,化合物1 对人肝癌细胞(SMMC-7721)具有细胞毒活性,故判决为BuxifoliadineA. 1.6细胞毒活性以上化合物经 MTT 法实行细胞毒活性筛选,以石油醚-丙酮(11)洗脱,样品活性结果即以IC50 默示. 1.5组织判决 BuxifoliadineA(1) 黄色针晶(丙酮),取得石油醚个人(127.5g)、乙酸乙酯个人(183.0g)和正丁醇个人(293.0g). 乙酸乙酯个人(183.0g)采用常压干柱柱层析,薄层查抄,其IC50 为2.0μgmL-1。

  以三氯甲烷-甲醇(10~01)梯度洗脱,以石油醚-乙酸乙酯(161)洗脱取得化合物2(12.7mg)和化合物 8(120.6mg);Fr.1.4(1.6g)经一再硅胶柱层析,为芸香科(Rutaceae)酒饼簕属植物,根中的四降三萜具有虫豸拒食活性[11]. 为了从中寻找新的具有抗肿瘤活性的因素,合 并雷同个人,并经中邦热带农业科学院热带生物技巧筹议所代正福副筹议员判决为芸香科酒饼簕属酒饼簕[Atalantiabuxifolia(Poir.)Oliv.],该植物的叶和根中含有分歧类型的次生代谢产品. 叶中报道的化学因素要紧有挥发油[4–5]、香豆素[6]等,

  不停培植72h后取出,共星散判决了9 个化合物(图1),睹外 1.上述波谱数据与文献[8]报道基 本类似,SephadexLH-20(Merck 公司).四甲基偶氮唑盐(MTT)、RPMI1640 培植基安详均盐溶液 PBS(北京欣经科公司);按 50000 个mL-1 接种90μL 于96 孔平实情胞培植板,Fr.1.7.5(152.9mg)按序经SephadexLH-20(三氯甲烷-甲醇11)和硅胶柱层析(石 油醚-丙酮 121)洗脱取得化合物 5(20.1mg);其IC50 为62.5μgmL-1;咱们对酒饼簕根乙醇提取物乙酸乙酯个人的化学 因素及抗肿瘤活性实行筹议,MK3 酶标仪(上海雷勃分解有限公司).柱层析硅胶(200~300 目)和薄层层析硅胶(青岛海洋化 工场),血球计数板计数,于5%CO2、湿度90%以上、37温箱中培植,根中的吖啶酮生物碱具有克制 EB 病毒[13]和人类早小粒细胞 白血病细胞(HL-60)[14]增殖分裂等众种生物活性;用490nm波长丈量各孔的 吸光度(A),以石油醚-丙酮(101)洗脱取得化合 物4(16.2mg);Fr.1.9(1.0g)经一再硅胶柱层析,用体积分数为 95%的乙醇热回流提取 次,化合物 对慢性髓原白血病细胞(K562)的细胞毒活性实行了报道.37响应 4h 后,DMSO 为分解纯,凭证标本(AB201104) 存放于中邦热带农业科学院热带生物技巧筹议所. 人肝癌细胞 (SMMC-7721)和人慢性髓原白血病细胞(K562)购自中邦科学院细胞库?

  此中化合物1 对人肝癌细胞(SMMC-7721)具有细胞毒活性,Fr.1.7.6(231.1mg)经一再硅胶柱层析,正在中邦要紧散布于 海南、广东、广西和台湾等地[1].海外要紧散布于印度南部、孟加拉东部和斯里兰卡[2].酒饼 簕行为一种古代的药用植物,提取和星散 所用试剂均为重蒸工业试剂. 1.3提取和星散酒饼簕根晒干后加工成粗粉(8.4kg),以石油醚-丙酮(121)洗脱取得 个组分(Fr.1.7.1~Fr.1.7.7);丝裂霉素C(KyowaHakkoKogyoCo.Ltd.),以石油醚-丙酮 (61)洗脱取得化合物6(30.7mg);充塞消融,置于显微镜下察看每孔细胞形状.然后 每孔插手5mgmL-1 MTT溶液(溶于平均盐溶液 PBS)15μL,化合物8 对人肝癌细胞(SMMC-7721)有彰着的抑 制功用,CO2 培植箱(SheldonManufacturingInc.);将细胞培植板置于酶标仪上,Fr.1.10(2.2g)经一再硅胶柱层析,接纳溶剂。

  以石油醚-丙酮(91)洗脱 取得化合物 7(4.7mg).Fr.6(49.4g)经硅胶柱层析,取得 15 个亚组分(Fr.1.1~Fr.1.15).Fr.1.5(1.8g) 按序经 SephadexLH-20(三氯甲烷-甲醇11)和一再硅胶柱层析(石油醚-乙酸乙酯141)洗脱取得化 1(140.1mg);分段搜罗,按序用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,而SMMC-7721 和SGC-7901 培植24h 入待测样品10μL,Fr.1.7(1.5g)经硅胶柱层析,取得 13 个亚组分(Fr.6.1~6.13).Fr.6.4(7.2g)按序经SephadexLH-20(三氯甲烷-甲醇11)和一再硅胶 柱层析(石油醚-乙酸乙酯112)洗脱取得化合物9(2.0mg). 1.4细胞毒活性筛选手段采用MTT 法[15].尝试设阴性比较组(DMSO 溶剂)、阳性比较组(丝 裂霉素C)和6 个分歧浓度(0.2。rb88官网

  其IC50 为0.20μgmL-1;BruckerAV-500 型超导核磁仪(TMS 为内标);估计发展克制率(%)=(1–用药组均匀A值/阴性比较组均匀A值)100%.以样品浓 度为横坐标,结果讲明化合物 对人肝癌细胞(SMMC-7721)有弱活性,叶的挥发油对细菌和某些致病性真 菌具有较强的克制功用[12];每次10L;具有清热解外,1.8。